Основные сведения Синдром раздраженного кишечника у пациентов вызывает аномальное висцеральное восприятие.
Пробиотические организмы могут оказывать благотворное воздействие на этих пациентов за счет снижения висцеральной гиперчувствительности. Цель Изучить влияние пробиотического организма, Bifidobacterium infantis 35624, на поствоспалительную висцеральной гиперчувствительности у крыс. Методы Колит был индуцирован введением в толстый
кишечник тринитробензолсульфоновой кислоты; контрольные крысы получали физиологический раствор (0-й день). Были определены уровни миелопероксидазы (МПО) и показатели поражения толстой кишки. С 15-го по 29-й день крысам (n = 10/группа) перорально вводили 2 мл B. infantis ≥ 108 КОЕ/мл или плацебо (бульон MRS (по Ману, Рогозе и Шарпу)). Второй серии крыс (n = 10/группа) вводили пробиотик аналогичным образом с 15-го по 59-й день. Уровень стимуляции толстой кишки при колоректальном вздутии (КРВ) определяли путем записи висцеромоторной реакции (ВМР) на КРВ при 30 мм
рт. ст. до и после лечения.
После лечения образцы толстой ткани взвешивали, оценивали на морфологическое повреждение и анализировали на уровни МПО.
Результаты Все крысы проявили гиперчувствительность на 15-й день. В 30-й день повышенная чувствительность к
колоректальному вздутию сохранялась в группе плацебо, но была значительно снижена в группе B. infantis (средний
показатель ВМР/10 мин: плацебо = 15,4 ± 1,0 в сравнении с B. infantis = 7,6 ± 1,0, p < 0,001). Аналогичный статистически значимый эффект наблюдался на 60-е сутки.
Как в день 30, так и в день 60 вес ткани, баллы повреждения толстой кишки и уровни МПО были схожими с аналогичными показателями животных контрольной группы.
Выводы Пероральное введение Bifidobacterium infantis 35624 нормализует чувствительность на вздутие прямой кишки в исследовании экспериментальной поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки на крысах.

Ключевые слова Бифидобактерии · Животное · Болезнь · Модель · Синдром раздраженного кишечника · Крысы · Пробиотики

Хотя этиология и патофизиология синдрома раздраженного кишечника (СРК) неизвестны, симптомы включают абдоминальные судороги и боль, которые часто сочетаются с аномальным режимом дефекации, включая диарею, запор или чередование эпизодов обоих. Одним из важных наблюдений является то, что симптомы СРК частично обусловлены изменениями в висцеральном восприятии [1–3]. Также важным является наблюдение, что у до 40 % пациентов с СРК может наблюдаться корреляция возникновения их симптомов с нормализацией предшествующего колита [4, 5]. Поскольку эпизоды колита включают как взаимодействие с бактериальной флорой, так и иммунные реакции в кишечнике [6, 7], терапия, которая может влиять на оба этих фактора, может быть эффективной для предотвращения висцеральной
гиперчувствительности.
Пробиотические бактерии определяют как безвредные организмы, способствующие общему здоровью желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) [8, 9]. Пока точные механизмы действия неизвестны, пробиотические бактерии могут внести вклад в здоровье ЖКТ путем повышения полезной реакции иммунной системы или ингибирования патогенных бактерий [9]. Клинические исследования показали позитивное влияние пробиотических бактерий Bifidobacterium infantis 35624 на
иммунный ответ и симптомы СРК [10, 11].
Для проверки гипотезы о том, что пробиотические бактерии оказывают благотворное влияние у пациентов с СРК путем снижения поствоспалительной висцеральной гиперчувствительности нами исследовано влияние приема внутрь B. infantis 35624 на гиперчувствительность толстой кишки в валидированной экспериментальной модели грызунов, у которых острое воспаление толстой кишки связано с длительной висцеральной гиперчувствительностью [12–16].

Животные

Взрослые самцы крыс линии Sprague–Dawley (Чарльз Ривер, Уилмингтон, Массачусетс) весом 200–225 г были размещены отдельно в стерильные клетки в виварии центра по делам ветеранов при контролируемых условиях освещения (циклы темнота-освещение 12 часов), со свободным доступом к воде и пище, условия исследования были утверждены комитетом Медицинского центра по делам ветеранов (VAMC) по уходу и использованию животных в исследованиях. В течение первых 5–8 дней после прибытия животные привыкали к виварию VAMC.
Кроме того, за 7 дней до оценки чувствительности толстой кишки крыс доставляли в лабораторию на 2 ч ежедневно
между 10:00 и 14:00 для акклиматизации в лаборатории.

Индукция колита

Крыс не кормили в течение ночи (от 12 до 18 ч), а затем быстро ввели инъекции обезболивающего – изофлурана (5 %). В состоянии седации крысам устанавливали клизму (8,0 см от анального отверстия, гибкая трубка ВД 3,0 мм)
тринитробензосульфоновой кислотой (ТНБС) (50 мг/кг, 0,5 мл, 25 % этанола). Используя ту же методику, дополнительной серии контрольных крыс установили клизму с физиологическим раствором (0,5 мл). Чтобы предотвратить потерю жидкой клизмы, крыс держали так, чтобы прямая кишка была приподнята по отношению к голове до момента восстановления сознания.

Подготовка бифидобактерий

Запасы замороженного пробиотика B. infantis 35624 хранились при -86 °С до использования. Свежие бактериальные культуры готовили из оттаявших замороженных запасов, добавляя 100 мкл в 9 мл бульона МРС и инкубируя при 37 °С в течение 48 ч в анаэробном флаконе. Мутные культуры затем перемешивали в вихревой мешалке, перенося в стерильные 50 мл конические пробирки, и центрифугировали при 8000 об/мин в течение 10 мин при температуре 15 °С. Затем культуры концентрировали путем удаления 2,5 мл бульона. Затем бактериальный осадок размешивали, делили на аликвоты (≥ 108 КОЕ/мл) и хранили при 4 °С. Для проверки чистоты каждой аликвоты в каждой культуре проводили изолированные полосы
дважды. Бактериальную концентрацию определяли трижды от 10-6 до 10-9 путем серийного разбавления 1 мл базовой культуры в 9 мл стерильного PBS (натрийфосфатного буфера) и распределения на слайде 100 мкл.
Каждую культуру субкультивировали однократно путем добавления от 100 мкл до 9 мл МРСБ и инкубации, как описано выше.

Дозировка

Для дозирования иглы для кормления 16 калибра стерилизовали огнем и использовали для приготовления в 3 мл шприце, чтобы доставить 2 мл культуры (примерно 2,9 х 108 КОЕ) или бульона МРС. Как только все шприцы были подготовлены, крыс быстро поместили в пластиковый ограничивающий конус и дали пероральные дозы препаратов исследования. Животные группы плацебо получали препарат первыми, затем исследователи поменяли перчатки, чтобы избежать перекрестного заражения между группами. Животные в первой серии получали B. infantis или плацебо каждый день с 15-го по 29-й день, животные во второй серии получали B. infantis или плацебо ежедневно с 15-го по 59-й день. Доза B. infantis была выбрана таким образом, чтобы отображать дозировки, использованные в клинических исследованиях [10, 11].

Измерение висцеромоторной поведенческой реакции

Крыс не кормили ночью (в течение 12–18 ч) и доставили в лабораторию для проведения тензометрии. Кратко этот процесс можно описать следующим образом: при непрерывном введении изофлурана 1,5–3,0 % в брюхе крысы был сделан небольшой надрез. Тензометрический датчик («Р Б Продактс», Мэдисон, Висконсин) вшивали в этот надрез (семь швов, 3–0 шелк) справа от наружной косой мышцы, на расстоянии 1 см от срединной линии.
Затем кожу над тензометрическим датчиком зашили, а подводящие провода были установлены вокруг правого бока крысы, где они были закреплены сзади одним швом к коже. Колоректальный баллон (5 см, латекс) после этого вводили через анальный канал (11 см), а затем прикрепили к основанию хвоста пластырем. После того как животное пришло в себя после операции, тензометрический датчик был подключен с помощью экранированного кабеля к полиграфу Grass Model 7 («Астро-Мед Инк.», Уэст-Уорик, Род-Айленд) для записи сокращений мышц брюшной полости или движения. Чтобы определить висцеромоторную реакцию (ВМР) при колоректальном вздутии (КРВ) (30 мм рт. ст.), сокращения мышц в брюшной полости регистрировали на протяжении периода вздутия 10 минут. Каждый эксперимент ВМР включал всего шесть растяжений (10 минут при 30 мм рт.ст.) с интервалом отдыха длительностью 10 минут (0 мм рт. ст.).
После исследования ВМР крысам ввели изофлуран – седативное вещество, как описано ранее, а кишечный баллон и тензометрический датчик были аккуратно удалены. Надрез был закрыт 3–0 шелковой нитью, на рану зоны надреза нанесли обезболивающую/антибактериальную мазь. После завершения протокола дозирования крыс умертвили ингаляцией изофлурана перед удалением оборудования или отбором ткани кишечника.

Морфологическая оценка

Для проверки отсутствия грубого воспаления на 30-й или 60-й день после клизмы после эвтаназии вся толстая кишка
была удалена из крысы. Дистальные 2 см были удалены, а затем следующие 5 см были сохранены для выставления морфологической оценки. Образец 5-сантиметровой ткани кишечника был раскрыт вдоль границы с брыжейкой и
очищен физиологическим раствором. Ткани взвешивали и присваивали морфологический балл по следующей шкале
(адаптировано из [17]): 0 = без повреждений; 1 = локализованное воспаление, без язв; 2 = одна язва, без воспаления; 3 = язва с воспалением в одном месте; 4 = две или более язвы и/или очаги воспаления; 5 = две или более язвы и/или очаги воспаления с одним участком протяженностью 1 см вдоль ткани. Образцы ткани толстого кишечника были заморожены в жидком азоте для последующего анализа.

Анализ миелопероксидазы (МПО)

Активность МПО – это быстрое биохимическое измерение инфильтрации нейтрофилами, которое положительно
коррелирует с системами гистологической оценки и отражает степень воспаления в ткани кишечника [16, 18], ее измеряли в этом исследовании, чтобы обеспечить дополнительное доказательство отсутствия воспаления через 30 или 60 дней после установки клизмы.
Замороженные образцы ткани кишки взвешивали и гомогенизировали в соотношении 20 мг ткани и 1 мл следующего буфера: 50 мМ KH2PO4, 100 мМ Na2HPO4, 0,5 % (вес к объему) гексадецилтриметиламмоний бромид (ГТАБ), pH 6,0. Часть гомогенизированного образца (0,2 мл) затем помещали в криогенную пробирку и замораживали в жидком азоте. После того как все образцы были гомогенизированы, их оставляли оттаивать при комнатной температуре (30 минут). Оттаявшие образцы отрабатывали в течение 10 секунд на ледяной ванне и повторно замораживали в жидком азоте. Затем образцы
медленно размораживали на льду (60 минут) перед повторной заморозкой в жидком азоте. Наконец, образцам позволили медленно оттаять на льду (60 минут). После оттаивания образцы центрифугировали при 12000 об/мин и 10 мкл аликвоты в двух экземплярах добавляли в 96- луночный микропланшет. Строили стандартную кривую, состоящую из пероксидазы хрена (HRP) от 1 до 50 мг/ 10 мкл. Затем добавляли 100 мкл системы жидкого субстрата 3,3',5,5'-тетраметилбензидина (ТМБ) в каждую лунку и оставляли для завершения реакции в темноте в течение 10 минут. Затем реакцию останавливали путем добавления 100 мкл 0,1 м H2SO4 и проводили считывание поглощения при 450 нм с помощью ИФА-считывающего
устройства Dynatech MR5000. Результаты выражали в нг МПО на влажный вес ткани.

Статистические методы

Животные, которые были гиперчувствительны к КРВ на 15-й день, были случайным образом разделены на группы
лечения. Пять крыс было исключено из исследования после рандомизации на основании отсутствия гиперчувствительности толстой кишки на 15-й день. Данные по сериям анализировали отдельно в точке времени до и после приема препарата для сравнения групп по показателю ВМР. Непарный двухвыборочный критерий Стьюдента использовался для сравнения групп лечения перед лечением. Группы лечения сравнивали после приема продуктов при использовании ковариационного анализа с базовым показателем ВМР в качестве ковариата (независимой переменной). Результаты анализа МВР выражали как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM). Анализ повреждения ткани толстой кишки, влажный вес ткани и показатели МПО толстой кишки проводили при помощи параметрического или
непараметрического однофакторного дисперсионного анализа (Крускала-Уоллиса) соответствующим образом. P < 0,05рассматривался как статистически значимый для всех критериев. Статистические тесты проводились при использовании ПО The Statistical Analysis System, версия 9.2 («САС Инститьют», Кэри, Северная Каролина, США) и GraphPad Prism 4.0c («ГрафПэд Софтвэр», Сан-Диего, Калифорния).

Верификация поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки

В данном исследовании мы подтвердили, что прием колоректально ТНБС привело к поствоспалительной хронической гиперчувствительности к растяжению прямой и толстой кишки, как показано в ранее проведенных исследованиях [14, 16]. В частности, на 15-й день после установки клизмы у всех крыс оценивали чувствительность толстой кишки, а в текущем
исследовании использовали гиперчувствительные реакции на низкий уровень (30 мм рт. ст.) КРВ. Как показано на рисунке 1a, на 15-й день крысы, которым была установлена клизма с ТНБС, имели гиперчувствительную реакцию на КРВ, оцениваемую по показателю ВМР (13,3 ± 1,1); гораздо меньшая реакция была замечена в группе, которая получила только клизму с физиологическим раствором (6,3 ± 0,8, p < 0,001). Эта гиперчувствительность к безболезненной КРВ все еще отмечалась на 30-й день у крыс, которые получали клизму с ТНБС (ТНБС: 12,6 ± 1,0, физиологический раствор: 8,1 ± 0,7, p < 0,01). Влияние B. infantis 35624 на чувствительность толстой кишки Через 30 дней после установки клизмы, как и в 15-й день, группа, принимавшая плацебо, сохранила гиперчувствительность к расширению просвета прямой и толстой кишки (рис. 1b).

Рис. 1 a Подтверждение поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки. Крысам ставили клизму либо с физраствором (незакрашенные гистограммы, n = 10), либо с ТНБС (гистограммы темно-серого цвета, n = 6) в день 0. Представленные данные – это ВМР на КРВ (среднее значение ± SEM), измеренная через 15 и 30 дней после клизмы. ** p < 0,01, *** p < 0,001 в сравнении с физиологическим раствором. b Последствия 15-дневного приема B. infantis 35624 на поствоспалительную гиперчувствительность толстой кишки. Всем крысам ставили клизму с ТНБС в 0-й день. На 15-й день после клизмы крысам стали вводить суточные дозы (2 мл, перорально) либо плацебо (МРСБ, черные гистограммы, n = 10), либо B. infantis 35624 (светло-серые гистограммы, n = 9) до 30-го дня. Представленные данные – это ВМР на КРВ (среднее значение ± SEM), измеренная через 15 и 30 дней после клизмы. p < 0.001 в сравнении с плацебо. c Действие через 45 дней после приема B. infantis 35624 на поствоспалительную гиперчувствительность толстой кишки. Всем крысам ставили клизму с ТНБС в 0-й день. На 15-й день после клизмы крысам стали вводить суточные дозы (2 мл, перорально) либо плацебо (МРСБ, черные гистограммы, n = 10), либо B. infantis 35624 (светло-серые гистограммы, n = 10) до 60-го дня. Представленные данные – это ВМР на КРВ (среднее значение ± SEM), измеренная через 15 и 60 дней после клизмы. p < 0,01, в сравнении с плацебо.Наоборот, группа, которая принимала B. infantis 35624, демонстрировала ВМР, схожую с той, которую показывали контрольные крысы, не имеющие реакции гиперчувствительности (им была поставлена клизма с физиологическим раствором). Ежедневный прием плацебо с 15-го по 30-й день привел к незначительному снижению (13 %) колоректальной гиперчувствительности, в то время как ежедневный прием B. infantis 35624 привел к 57 % снижению среднего показатели ВМР. Крысы, принимавшие в течение 15 дней B. infantis 35624, имели значительно более низкую ВМР к КРВ (30 мм рт. ст.) по сравнению с группой плацебо на 30-й день после клизмы (p < 0,001).
В отличие от ответа на 30-й день (рис. 1b), на 60-й день после клизмы группа плацебо не проявляла
последовательную гиперчувствительность к КРВ (рис. 1c). Это привело к ВМР на 37 % ниже среднего показателя для группы плацебо, что свидетельствует о том, что произошло снижение колоректальной
гиперчувствительности, однако реакция сохранялась более высокой, чем в группе физиологического раствора на 30-е сутки. Одновременный прием B. infantis 35624 в срок с 15-го по 60-й день статистически значимым образом снизил ВМР к КРВ (30 мм рт. ст.) на 55 % (p < 0,01).

Влияние B. infantis 35624 на целостность слизистой
оболочки толстой кишки

Сводные данные по показателю повреждения толстой кишки, влажному весу толстой кишки (5 см) и уровням MPO представлены в таблице 1. В целом, все три параметра показали, что острое воспаление толстой кишки, вызванное клизмой ТНБС, к 30-му дню или 60-му дню спало, что подтвердило дополнительную эффективность для поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки. Кроме этого, толстые кишки крыс групп, которые получали B. infantis, были похожи на толстые кишки крыс групп, которым была поставлена клизма с физиологическим раствором.

Одно исследование показало, что B. infantis 35624 снижает болевое поведение при вздутии прямой и толстой кишки на двух породах крыс; этот эффект не был замечен с Lactobacillus salivarius UCC118 или Bifidobacterium breve UCC2003 [19]. Было выявлено, что прием Lactobacillus paracasei снижает повышение висцеральной чувствительности во время применения антибиотиков у мышей [20], в то время как прием бактерии Lactobacillus farciminis предотвращает вызванную стрессом гиперчувствительность толстой кишки и парацеллюлярную проницаемость у крыс [21]. Еще одно исследование показало ингибирующее воздействие живых и убитых нагреванием Lactobacillus reuteri на висцеральную боль, вызванную вздутием толстой кишки у крыс [22].
Эти данные также согласуются с результатами клинических исследований B. infantis 35624 у пациентов с СРК. Пилотное исследование 77 пациентов с СРК, которые в течение 8 недель принимали либо L. salivarius, либо B. infantis 35624 (оба продукта в ежедневной дозировке 1010 КОЕ в молоке) показал, что B. infantis 35624, но не L. salivarius, облегчает симптомы СРК (например, боль/дискомфорт, вздутие живота/вздутие), а также нормализует соотношение противовоспалительных и
провоспалительных цитокинов (IL-10/IL-12) [10]. В более крупном исследовании 362 пациентки женского пола с СРК ежедневно принимали B. infantis 35624 (106, 108 или 1010 КОЕ) или плацебо в капсуле в течение 4 недель [11].
Основная группа лечения (1010) не отличалась от плацебо по симптомам СРК, но было выявлено, что в этой группе имелись статистически значимые эффекты в зависимости от содержания активного вещества. В группе 108 были отмечены статистически значимые улучшения по сравнению с плацебо по 9 из 11 симптомов СРК.
Знание о нервной регуляции пищеварительной системы, концепции двунаправленных влияний между головным мозгом и комменсальными бактериями, которые влияют на физиологию организма хозяина, является постоянно развивающейся областью исследования ЖКТ (рассмотрено в [23]). Интересно отметить, что бактерии могут влиять на клетки эпителия толстой кишки, стимулируя синтез хемокинов, которые нацелены на борьбу с патогенными бактериями [24], в то же время способствуя дифференциации иммунных клеток, что приводит к переносимости комменсальных штаммов, а также поражает патогенные микроорганизмы для их устранения [25, 26]. Таким образом, считают, что нарушения в кишечной микрофлоре провоцируют развитие заболеваний ЖКТ.
В самом деле, два исследования показали, что микробиота кала пациентов СРК существенно отличается от аналогичных показателей здоровых контролей [27, 28]. В данном исследовании бактериальная флора грызунов влияет на ТБНС-колит, поскольку анаэробные штаммы связаны с трансмуральным воспалением [29], и существует положительная корреляция между оценками макроскопического повреждения и количеством общей флоры толстой кишки [30]. Таким образом, мы можем ожидать, что комменсальная флора крыс в этом исследовании повлияла на степень острого колита, индуцированного ТНБС; однако мы не можем размышлять по поводу состава кишечной флоры в день 30 или 60 после клизмы. Будущие исследования обеспечат более тщательное изучение изменений флоры кишечника в поствоспалительном состоянии, чтобы дать представление о потенциальных механизмах эффективности B. infantis 35624 в профилактике поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки.
Клинические исследования показали нарушение функции слизистой оболочки, в том числе повышенную проницаемость толстой кишки, у постинфекционных больных СРК (рассмотрено в [31, 32]). У грызунов при
активном ТНБС-индуцированном колите наблюдается повышенная проницаемость толстой кишки [33, 34], которая сохраняется не менее 1 недели после клизмы с ТНБС [35]. Показано также, что колит, вызванный ТНБС, также вызывает сопутствующее увеличение проницаемости гематоэнцефалического барьера за тот же период времени [36], что может способствовать центральной сенсибилизации и/или дисфункции оси стресса, о чем свидетельствует усиление экспрессии
кортикотропин-высвобождающего фактора в паравентрикулярном ядре гипоталамуса в течение 3 и 30 дней после клизмы [37]. При ТНБС-колите модель
воспалительного заболевания кишечника показала, что воздействие пробиотиков на кишечную проницаемость
является штамм-специфическим. Два исследования Ламин (Lamine) и др. [38, 39] показали, что при дозировании в течение 15 дней до клизмы, в течение 4 дней после клизмы Lactobacillus farciminis могут предотвратить как повреждение слизистой, так и повышенную проницаемость толстой кишки, связанную с колитом вследствие воздействия ТНБС. В отличие от этого, Lactobacillus plantarum species 299 не удалось изменить количество поражений толстой кишки или связанное с
этим увеличение проницаемости через 1 неделю после клизмы, когда дозирование было начато через 24 ч после
клизмы ТНБС [40].
В то время как проницаемость в данном исследовании не оценивалась, используя аналогичный экспериментальный
протокол, Соммерфилд (Sommerfield) и соавт. [41] показали, что карбахол-индуцированная секреция толстой кишки на 30-е сутки после клизмы с ТНБС была снижена через 15 дней приема B. infantis 35624, что подтверждает
роль B. infantis 35624 в поддержании целостности слизистой оболочки толстой кишки. Существует также доказательство того, что B. infantis может вырабатывать факторы, которые непосредственно улучшают целостность слизистой оболочки толстой кишки. Клетки T84 человека, обработанные подготовленными средами из B. infantis, имели как повышенную трансэпителиальную резистентность, так и повышенную экспрессию белков плотного соединения, в то время как в тех же средах уменьшались показатели гистологического воспаления и значительно уменьшался поток маннитола в толстой
кишке мышей без IL-10 [42]. Поскольку повышенная проницаемость кишечника может способствовать постинфекционным симптомам СРК через местное высвобождение иммунных медиаторов, которые стимулируют висцеральные афференты [32], в дальнейших исследованиях будет рассмотрено ингибирование поствоспалительной гиперчувствительности толстого кишечника приемом B. infantis 35624 за счет нормализации кишечной проницаемости.
Хотя точные механизмы неизвестны, текущие данные свидетельствуют о патологическом переходном затухании между иммунной и нервной системами через цитокины и другие медиаторы воспаления, которые способствуют сенсибилизацииафферентов в качестве вероятной причины развития поствоспалительной висцеральной
гиперчувствительности (обзор [43, 44]). В поддержку механизма центральной сенсибилизации Чжоу (Zhou) и коллеги [45] доказали, что крысы с поствоспалительной гиперчувствительностью толстой кишки через 16 недель после ТНБС-клизмы имеют повышенную экспрессию сплайс-вариантов NR1 субъединицы с рецепторами N- метил-D-аспарагиновой кислоты (НМДА) на поверхностной пластинке спинного мозга. Эти изменения на уровне спинного мозга предшествует изменению
экспрессии NR1 сплайс-вариантов в миэнтерическом сплетении через 4 недели после постановки клизмы с ТНБС [46]. Однако влияние B. infantis 35624 на выражение приемного устройства NMDA неизвестно. Серотонин (5- НТ) – еще один потенциальный посредник поствоспалительной гиперчувствительности, которая может действовать и централизованно, и периферийно.
Как в мышиной модели постинфекционной висцеральной гиперчувствительности, так и в модели поствоспалительной гиперчувствительности крыс экспериментально индуцированная гиперчувствительность может быть ингибирована селективными антагонистами рецепторов 5-НТ3 [47, 48]. Кроме того, как в обычных, так и отлученных от матери крыс Spraque-Dawley хронический прием B. infantis 35624 привел к снижению содержания метаболита серотонина, 5-гидроксииндолуксусной кислоты (5-НІАА) в определенных зонах головного мозга [49, 50]. Определение того, влияет ли B. infantis 35624 на содержание 5-HT и/или метаболизм в этой модели поствоспалительной гиперчувствительности толстой
кишки, еще необходимо изучить. Наконец, вагальные афференты опосредуют противовоспалительное действие при колитах, вызванных ТНБС, т. е. воспаление было сильнее у животных с вагальной деафферентацией [34].
Аналогичный противовоспалительный механизм, зависящий от блуждающего нерва, был показан в модели на мышах с использованием декстрансульфата натрия для стимулирования колита [51].
Однако прием B. infantis 35624 позволил добиться снижения показателей активности заболевания и тканевых маркеров воспаления в аналогичной степени в моделях у симулированных и ваготомизированных мышей, что позволяет предположить, что вальгусный антиноцицептивный механизм [52, 53] не оказывает опосредствующего влияния на действие B. infantis в этом исследовании.
В заключение следует отметить, что пероральный прием B. infantis 35624 нормализовал чувствительность к вздутию
толстой кишки у крыс в экспериментальной модели поствоспалительной гиперчувствительности толстой кишки. Для изучения многочисленных потенциальных механизмов действия для нормализации кишечной гиперчувствительности планируются дополнительные исследования.
Благодарность Данное исследование было поддержано исследовательским грантом от компании «Проктер Энд Гэмбл» (Procter & Gamble).